请问硫酸铵沉淀的方法是什么?

请问硫酸铵沉淀的方法是什么?

硫酸铵可能会损坏某些蛋白.加入硫酸铵晶体时应小心：局部浓度过高可能会造成不需要的蛋白沉淀. 对于常规可再生的纯化过程,可以避免使用硫酸铵沉淀以利于层析. 通常沉淀对于浓度低于1mg/ml的搜粗蛋白几乎无效. 沉淀所需溶液： 饱和硫酸铵溶液（在100ml蒸馏水中加入100g硫酸铵,搅拌溶解）. 1M Tris-HCl,pH 8.0 用于第一步纯化的缓冲液. 方法： 1,过滤（0.45μm膜）或离心样品（4°C 10000g）. 2,每10倍体积的样品中加入一倍的1M Tris-HCl,pH 8.0以维持pH值. 3,温和搅拌.逐滴加入硫酸铵溶液,最高至50%饱和度.搅拌1小时. 4,10000g离心20min. 5,去除上清,用等体积相同浓度的硫酸铵溶液（如不能溶解沉淀也不会造成进一步沉淀的溶液）洗涤重悬沉淀两次.再次离心. 6,使用肆桐少量体积后面步骤所需的溶液溶解沉淀. 7,硫酸铵在净化/更换缓冲液步骤中使用脱裂漏坦盐柱除去.

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